荔园分子平台——定点突变
实验原理
PCR定点突变是根据突变方案设计合成覆盖突变位点的双向引物,通过PCR向目的DNA片段中引入所需的变化,如碱基的插入、删除、替换等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。
实验流程
实验结果示例
图1 PCR定点突变实验结果
A:目的片段的PCR扩增结果;B:目的片段的菌落PCR鉴定结果(泳道1:阴性对照;泳道2:阳性对照;泳道3-5:1-3号克隆的菌落PCR鉴定结果,全部为菌落PCR阳性样本)。C:目的片段的酶切电泳结果(泳道1:目的片段的酶切电泳结果,载体片段4700bp,目的片段1100bp)。