甲基化检测-分子平台-荔园基因科技（深圳）有限公司

分子平台

荔园分子平台——甲基化检测

实验原理

DNA甲基化存在于大多数真核生物中，一般发生在CpG双核苷酸中胞嘧啶的5’UTR区，起调控作用。CpG的胞嘧啶大概有80%被甲基化，20%处于基因调控区的CpG岛中。BSP甲基化测序（Bisulfite Genomic Sequencing PCR）的原理通过对基因组DNA进行重亚硫酸盐处理，非甲基化的胞嘧啶被脱氨基而转变成尿嘧啶，在随后的PCR反应中尿嘧啶转变成胸腺嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不能被脱氨基，在反应完成时被保留（见下图），我们将扩增得到的PCR产物进行TA克隆测序，就可以分析甲基化发生的具体情况。该方法实验结果准确性高，是甲基化检测的金标准。

实验流程

实验结果实例

图1 三样本的甲基化结果圈点图分析

注：图中有三个样本，每个样本含5个克隆测序结果，共计15个测序结果。每个圆圈代表一个CG位点，黑圈代表甲基化，白圈代表未甲基化；每一行代表一个样本TA克隆的一个测序结果，序列中所有的CG位点情况可被被罗列，此例序列中共含有31个CG位点。