荔园分子平台——ORF克隆
实验原理
ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA,反转录,设计合成特异性引物后,通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列,获得编码全长蛋白质序列的DNA序列:即从起始密码ATG到终止密码子,不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。
实验流程
实验结果实例
A B C
图1 目的基因的ORF克隆实验结果
A:样本1和样本2的RNA抽提电泳结果 ;B 不同扩增条件下目的片段的PCR扩增结果;C 目的片段酶切鉴定结果(T载体片段2692bp,目的片段1100bp)。