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分子平台


荔园分子平台——ORF克隆



实验原理


ORF克隆是指从样本组织或细胞中抽提总RNA,反转录,设计合成特异性引物后,通过RT-PCR扩增获得目的基因的DNA序列,获得编码全长蛋白质序列的DNA序列:即从起始密码ATG到终止密码子,不含5′和3′UTRs非翻译区及内含子序列。


实验流程



实验结果实例


  A                      B                          C



图1 目的基因的ORF克隆实验结果

A:样本1和样本2的RNA抽提电泳结果 ;B 不同扩增条件下目的片段的PCR扩增结果;C 目的片段酶切鉴定结果(T载体片段2692bp,目的片段1100bp)。